Маълумот

2.4: Тартиби лабораторӣ- Омода кардани васоити сахт, Техникаи асептикӣ, T-streaking- Биология


Натиҷаи омӯзиш

  • Барои шиносоӣ бо ду намуди расонаҳои фарҳангӣ, Шўрбои ғизоӣ ва Агари ғизоӣ.
  • Барои шинос кардани шумо бо техникаи асептикӣ.
  • Барои омӯхтани тарзи ҷудо кардани фарҳанги пок.
  • Дар ҳама ҷо ва гуногунрангии микроорганизмҳо мушоҳида кунед

Техникаи асептикӣ

Ба ҳисоби миёна инсон тақрибан 10 нафарро ташкил медиҳад13 ҳуҷайраҳои ҳайвоноти эукариотӣ ва 1014ҳуҷайраҳои микробҳои эукариотӣ ва прокариотӣ. Ин маънои онро дорад, ки 90% ҳуҷайраҳои "шумо" инсон нестанд.

Мақсади ин машқ аз он иборат аст, ки шумо бо усулҳои асептикӣ шинос шавед. Техникаи асептикиро метавон ҳамчун манипулятсияи асбобҳои безарар ё васоити фарҳангӣ ба тавре нигоҳ дошт, ки безурётиро нигоҳ дошт.

Дар табиат, микроорганизмҳо қариб ҳамеша ҳамчун популяцияҳои омехтаи намудҳои гуногун мавҷуданд. Аммо, пеш аз он ки аксари хосиятҳо ва хусусиятҳои организми мушаххас муайян карда шаванд, аввал организмро дар ҷудо кардан лозим аст фарҳанги тоза. Фарҳанги тоза онест, ки штамми ягонаи микроорганизмро дар бар мегирад. Масалан, фарҳанги тозаи бактерия Escherichia coli танҳо дар бар мегирад Escherichia coli ҳуҷайраҳои як штамми мушаххас - дигар микроорганизмҳои зинда вуҷуд надоранд. Истилоҳи штамм ба аҳолии ҳуҷайраҳо ишора мекунад, ки ҳама аз як ҳуҷайра ба вуҷуд омадаанд. Ҷудокунӣ ва нигоҳдории фарҳангҳои пок яке аз муҳимтарин тартиботи микробиология мебошад ва яке аз он ҳама донишҷӯён бояд шинос бошад.

Мисли ҳама организмҳои дигар, микроорганизмҳо барои афзоиш ва афзоиш маводи ғизоӣ ва муҳити мусоидро талаб мекунанд. Микробҳо одатан дар а маданнят ки дорои маводи ғизоӣ муҳим аст ва муҳити мувофиқро таъмин мекунад (масалан, рН -и мувофиқ). Микробҳо аслан дар муҳити моеъ парвариш карда мешаванд, шўрбоё дар муҳити сахт, агар.

Азбаски аксари таҳқиқоти лабораторӣ бо фарҳангҳои тоза гузаронида мешаванд, зарур аст безарар гардондан васоити фарҳангӣ, яъне тамоми организмҳои зиндаро комилан нест мекунанд. Ин восита бояд дар як нигоҳ дошта шавад безурёт шароите, ки аз организмҳои зинда озод аст, то он даме, ки бо фарҳанги тоза сиришта шавад.

Барои парвариши фарҳанги микробҳо дар муҳити стерилизатсияшуда, як қатор ҳуҷайраҳо, эмкунӣ, бо чораҳои махсус барои нигоҳ доштани тозагии фарҳанг интиқол дода мешаванд. Тартиботе, ки дар лабораторияи микробиология барои пешгирии ифлосшавии фарҳангҳои тоза истифода мешаванд, одатан чунин номида мешаванд техникаи асептикӣ.

Қоидаҳои умумии риояи техникаи асептикӣ инҳоянд: 1) ба маводи стерилӣ, ки худ безарар нест, ба ҷуз организми мушаххасе, ки шумо омӯхта истодаед, чизе нагузоред ва 2) маводи безарарро ба манбаи олудашавӣ, масалан, ҳавои лабораторӣ нагузоред.

Пас аз эмкунӣ фарҳанги микробҳо парвариш карда мешавад (инкубатор) дар муҳити мушаххас, ки барои афзоиш мусоид аст. Афзоиши микробҳо одатан аз рӯи он муайян карда мешавад ахолй афзоиш, афзоиши шумораи ҳуҷайраҳои аҳолӣ, баръакс мобилӣ афзоиш, афзоиши ҳаҷми як ҳуҷайраи инфиродӣ. Афзоиши натиҷа ҳамчун абрнокӣ, тирагӣ, дар муҳити моеъ ё ҳамчун массаи ҷудошуда намоён мешавад, колония, дар муҳити сахт.

Маводҳо:

Маданиятхо

Escherichia coli (фарҳанги шўрбо)

Serratia marcescens

фарҳанги шўрбои омехта Escherichia coli ва Serratia marcescens

ВАО

як шиша агар стерилӣ Nutrient агар

се қубур шўрбои ғизоии хушкида

се лавҳаи агар Nutrient, ки дар давоми 2 рӯз дар ҳарорати хонагӣ пешакӣ хушк карда мешавад

Маводҳо

чор зарфи петрии пластикии безарар

тампонҳои пахтаи стерилизатсияшуда

Мақсади ин машқ шинос кардани шумо бо усулҳои асептикӣ мебошад. Ҳама тартибот барои кам кардани ифлосшавӣ тарҳрезӣ шудаанд. Намоиши устоди лабораториро риоя кунед ва расмиёти дар дастур зикршударо дақиқ риоя кунед. Бактинаторро дар назди худ ҷойгир кунед ва ҳама найчаҳо ва дигар таҷҳизотро дар ҷои мувофиқ ҷойгир кунед, ки ба шумо имкон медиҳад бе ягон мушкилӣ ва бидуни сӯхтан ба онҳо бирасед.

Дар аввал ин тартиботи коркарди ҳалқа, қубурҳо ва сарпӯшҳо душвор хоҳад буд, аммо бо амалия ин манипулятсияҳо зудтар ва душвортар мешаванд.

Фаъолияти бактеринератор:

Бактинератор як стерилизатори бегаз, бе аланга, гармӣ барои истифода бо ҳалқаҳои эмкунӣ, сӯзанҳо, даҳони найчаи шиша/пипетка ва асбобҳои гуногуни шишагии металлӣ ва боросиликатӣ мебошад. Стерилизатсия тавассути гармии инфрасурх анҷом дода мешавад. ФАERОЛИЯТ: Калиди гузаришро ба Мавқеи "баланд"; чароғаки нишондиҳандаи сурх фурӯзон мешавад, вақте ки коммутатор дар ҳолати дуруст қарор дорад. Стерилизатор бояд 15 дақиқа пеш аз истифода гарм карда шавад. Халқаи эмкуниро аз дасташ нигоҳ дошта, ҳалқаи эмкуниро барои стерилизатсия кардан ба майдони стерилизатсияи силиндрӣ оҳиста гузоред (ба расми зер нигаред). Ҳамеша боварӣ ҳосил кунед, ки ашё бо маводи изолятсияшуда нигоҳ дошта мешавад. Ба ашёи стерилизатсияшуда бевосита даст нарасонед. Доираро дар он ҷо беихтиёр "таваққуф" накунед, ин кор хоҳад кард Гудохта. Барои таъмини дарозмуддати ҳалқа ва элементи гармкунак аз харошидан аз паҳлӯҳои элемент худдорӣ намоед. Давраро барои 5 сония нигоҳ доред. Барои дурахшон шудани ҳалқа шарт нест. Сипари берунии металлии унсури гармкунак метавонад ба ҳарорати то 400 ° F расад. Ба сипари металлии беруна даст нарасонед ё ба майдони атрофи стерилизатор ворид кардани ҳама гуна маводҳои оташгиранда ё зудгузар.

Пас аз анҷоми истифодаи он барои машқҳои лабораторӣ дар давоми рӯз, бактеринераторро хомӯш кунед.

A. Омода кардани маводи сахт

Миёнаи сахт одатан тавассути илова кардани агенти мустаҳкамкунанда ба муҳити шӯрбо сохта мешавад. Агенти маъмултарини мустаҳкамкунанда агар аст, моддаест, ки аз алафҳои баҳрӣ гирифта шудааст ва дар шакли хушкшудаи тозашуда мавҷуд аст. Агарчанд агарҳои гуногун аз рӯи хосиятҳои физикии худ хеле фарқ мекунанд, нуқтаи обшавии муқаррарӣ 97-100°С мебошад. Ҳамин тариқ, агар ба муҳити фарҳангии моеъ агари сахтро илова кардан мумкин аст ва ҳангоми стерилизатсияи гармӣ гудохта мешаванд. Пас аз стерилизатсия, ин васоити моеъро метавон ба пробиркаҳо, шишаҳо ё зарфҳои петри рехт. Ҳангоми хунуккунӣ, ин муҳити дорои агар дар тақрибан 42 ° C сахт мешавад. Пас аз сахт шудан, васоити агарро дар тамоми диапазони ҳарорате, ки эҳтимолан бактериолог истифода мебарад (то 70°С, шояд) бидуни гудохта инкубатсия кардан мумкин аст.

Ан агарчӣ натиҷа вақте ба василаи гармшавии гудохташудаи агар иҷозат дода мешавад, ки дар найчаи озмоишӣ, ки дар ҳолати нишеб нигоҳ дошта мешавад, сахт шавад. Ба зарфҳои пластикӣ ё шишагин василаи гудохта рехта мешавад заррин агар.

1. Чаҳор табақи петри хушкидаро дар тарафи рост ба боло дар пеш ҷойгир кунед.

Қисми плитаи петри нисбат ба боло хурдтар ва амиқтар аст, ки онро одатан зарф меноманд. Аз ин рӯ, тарафи рост ба боло вақте аст, ки поёни он бо курсӣ дар тамос бошад ва сарпӯши калонтар поёнро пӯшонад.

2. Бактинатори худро фаъол созед.

3. Шумо бояд ҳозир зуд кор кунед, то пеш аз ба охир расидани рехтани табақҳо мустаҳкам нашавед. Як шишаи муҳити гудохташудаи Nutrient агар аз ваннаи оби 55 ° C хориҷ кунед. Оби часпандаро аз шиша бодиққат тоза кунед, то вақте ки шумо ба шиша нӯг занед, ин оби олуда ба табақ намеравад.

4. Сарпӯши шишаро кушоед, аммо онро нагиред. Вақте ки сарпӯш то ба охир кушода мешавад, онро бо ангушти хурди рост ё чапи худ ва канори берунии кафи худ сарпӯш кунед. Ба Расми 1-1 а нигаред. Сарпӯшро дар болои курсӣ нагузоред.

5. Ҳангоми нигоҳ доштани сарпӯш шишаро бо ангушти калон ва ангушти дасти рости худ бехатар нигоҳ доред. Ба расми 1 нигаред. Лабони шишаро дар назди баксикенератор сабукӣ гузаронед, то ҳар як чангу часпандаро сӯзонед ва инчунин ҷараёни манфии ҳаворо созед. Лаби шиша аз тартиби автоклавкунӣ безарар хоҳад буд.

6. Сарпӯши табақи петри бо дасти чап ё рости худро ба қадри кофӣ баланд кунед, то ба шумо имкон диҳад, ки як қисми муҳаррики агарро ба поёни табақчаи петри бирезед. Ба расми 1-1б нигаред.

7. Ба поёни табақчаи петри миёна ба қадри кофӣ бирезед, то сатҳи поёни онро пӯшонед. (Шумо бояд ба осонӣ чор табақ ва эҳтимолан панҷ дона бо 100 мл миёна рехт.)

8. Сарпӯшро барои пӯшидани поёни табақчаи петри иваз кунед.

9. Табақҳои рехташударо бодиққат ва оҳиста ба як қисми бетартиб (пушт) болои курсии худ ғеҷонед, то хунук шавад ва мустаҳкам шавад. Ба ин плитаҳо ҳадди аққал 20 дақиқа халал нарасонед.

10. Ин лавҳаҳо дар қисми D -и ин машқ истифода мешаванд.

B. Интиқоли асептикӣ

Барои микробиолог интиқоли фарҳангҳо аз қубур ба қубур ва аз заррин агар ба қубурҳо як амали маъмул ва оддӣ аст, аммо таваҷҷӯҳи дақиқро ба ҷузъиёти муайян талаб мекунад. Интиқоли микроорганизмҳо аксар вақт бо истифода аз ҳалқаи сим анҷом дода мешавад. Истифодаи дурусти ин ҳалқаи эмгузаронӣ ба нигоҳ доштани фарҳанги тоза кумак мекунад.

1. Ба 3 қубурҳои шўрбои хушкидаи ғизоӣ тамғакоғаз кунед. Як "назорати безарар", як "интиқоли шӯрбо" ва як "интиқоли колония" -ро қайд кунед.

2. Фарҳангҳои шўрбои Escherichia coli ва фарҳанги табақ аз Serratia marcescens дар охири курсии шумо ҳастанд.

3. Доираи худро мисли қалам дошта, ҳалқаро ба майдони силиндрии баксикенератор гузоред. Танҳо симро дар стерилизатор гарм кунед, НЕ дорандаи сим. Агар дуруст кор карда шавад, он бояд танҳо 5 сония тӯл кашад, то тамоми сими хушкида шавад. Пас аз он ки ин рӯй дод, ҳалқаро хориҷ кунед. Ҳоло сим хоҳад буд безарар ва хеле гарм. Пеш аз истифода бурдани он ҳалқаро барои якчанд сония дар ҳаво хунук кунед. Ин аз куштани ҳуҷайраҳои интиқолшаванда ва пошидан, ки метавонад ба истеҳсоли аэрозолҳои ифлоскунанда оварда расонад, пешгирӣ мекунад.

3а. Акнун лӯлаи дорои фарҳанги покро гиред аз Escherichia coli бо дасти дигар, дар ҳоле, ки ҳанӯз дар нигоҳ доред безурёт ҳалқа Бо дасте, ки ҳалқа дорад, сарпӯшро аз қубури фарҳангӣ хориҷ кунед, то онро бо ангушти хурди худ ва канори берунии кафи худ иҳота кунед. Бубинед Расми л. НАКУНЕД cap ба курсии худ гузоред. Лабони найро дар назди баксикенератор сабук гузаронед.

4. Ҳоло ҳалқаро ба E. coli фарҳанги шӯрбо ва сипас онро хориҷ кунед, як даври фарҳангро аз қубур гузаронед. Бубинед Расми 2. Сарпӯши қубурро иваз кунед ва қубурро ба рахи нигоҳдорӣ баргардонед.

5. Сарпӯшро аз қубури шўрбои стерилизатсияшудаи ғизоӣ бо номи "интиқоли шўрбоиҳо" бо ҳамон тарзе, ки дар қадами 3а боло зикр шудааст, гиред ва бароред.

6. Тубро тақрибан ба 45° кунҷи тела кунед ва ҳалқаи дорои фарҳангро ба найчаи кушода гузоред. Доираро ба шӯрбо ғарқ кунед, ҳалқаро мулоим чарх занед ва сипас хориҷ кунед. Қубурро дар назди баксикенератор гузаронед ва сарпӯшро иваз кунед ва қубурро ба рафи анбор баргардонед.

7. Пеш аз гузоштани он ҳалқаро бо такрори қадами 3 стерилизатсия кунед. Ин барои пешгирӣ кардани олудашавии курсӣ бо фарҳанг зарур аст.

8. Ҳоло, бо дасти дигар, сарпӯши табақи петриеро, ки дорои фарҳанги поки он мебошад, баланд кунед Serratia marcescens. Гирифтани инкулум тавассути ТАНҲО ЯК БОР колонияҳои ягонаи ҷудошуда дар сатҳи агар. Ба агар кофта нашавед. Доираро дар рӯи табақ канда нагиред. Сарпӯши табақро фавран иваз кунед.

9. Сарпӯшро аз найчаи шўрбои безараргардонии маводи ғизоӣ бо нишони "интиқоли колония" ба ҳамон тарзе, ки дар қадами 3а дар боло зикр шудааст, гиред ва хориҷ кунед.

10. Қадамҳои 6 ва 7 -ро такрор кунед.

11. Барои санҷидани қобилияти дурусти стерилизатсия кардани ҳалқаи худ як ҳалқаи фарҳангро аз E. coli найчаи фарҳанги шўрборо бо тартиби дар қадамҳои 3, 3а, 4. зикршуда дуруст ҳалқаи дорои фарҳанги бактерияҳо стерилизатсия кунед, тавре ки дар қадами 7.

12. Сарпӯшро аз найчаи шўрбои безараргардонии маводи ғизоӣ бо нишони "назорати стерилӣ" ба ҳамон тарзе, ки дар қадами 3а дар боло зикр шудааст, гиред ва хориҷ кунед ва ҳалқаро тавре, ки дар қадами 6 тавсиф шудааст, ба шўрбо ворид кунед.

13. Қадамҳои 11 ва 12-ро бо ҳамон найчаи "назорати стерилӣ" чанд маротиба такрор кунед.

C. Плитаҳои стрейк

Техникаи табақаи стрейк як усули зуд ва оддии ҷудокунии бактерияҳо тавассути ба таври механикӣ паҳн кардани онҳо ба рӯи агари табақи петри мебошад. Ҳадаф ба даст овардани колонияҳои хуб ҷудошуда, ҳар як аз як бактерия бармеояд, то ки фарҳанги поки ҳар як намуди дилхоҳ дар омехта таъсис дода шавад. Ҷойгиркунии дурусти табақҳо як маҳорати нисбатан содда, аммо ҳатмист, ки барои ҳар як микробиолог лозим аст.

Усули асосии омодасозии табақаи стрейк паҳншавии як ҳалқаи яккаратаи inoculum дар болои муҳити агар -агарро дар бар мегирад. Усулҳои зиёде мавҷуданд, ки барои кашидани заррин истифода мешаванд. Интихоби техника як масъалаи афзалият ва доварии шахс аст. Ҳар гуна усулро метавон истифода бурд, то он даме, ки ҳадаф, истеҳсоли колонияҳои хуб ҷудошуда ба даст оварда шавад ва ягон далели ифлосшавӣ мавҷуд набошад. Тартиби дар поён тавсифшуда одатан пас аз аломатгузории дар поёни табақ гузошташуда "рахи T" номида мешавад.

1. Дар тамоми хат як тахта, тақрибан аз се як ҳиссаи поёнро кашед ПОЁН аз табақ. Сипас хати дуюмро аз мобайни якум тавассути марказ ба тарафи дигари табақ кашед. Ин бояд дар табақи шумо як "T" -и калон созад ва онро ба се бахш тақсим кунад. Ба расми 1-4 нигаред.

2. Нишон диҳед поён ҳар яке аз 3 табақчаҳои ғизоии омодашуда бо ном ё насаб, фасли лабораторияи шумо ва намудҳои бактерияҳое, ки бояд истифода шаванд. Илова бар ин, якеро "аз шўрбои", якеро "аз агар" ва якеро "фарҳанги омехта" қайд кунед.

3. Усулҳои асептикиро, ки дар қисми Б омӯхтаед, истифода баред. Халқаро стерилизатсия кунед ва онро хунук кунед.

Ворид кардани ҳуҷайраҳои бактерияҳоро аз:

• найчаи шўрбои дорои фарҳанги поки Escherichia coli

• лавҳаи агар аз Serratia marcescens

• найчаи шўрбои дорои фарҳанги омехта, ки инструктори шумо пешниҳод кардааст.

Ҳангоми гирифтани намунаҳо аз колонияҳое, ки дар плитаҳои агар парвариш мекунанд, он аст ТАНҲО зарур аст ва тавсия дода мешавад, ки лок ФАКАТ БА РУИ РУЙ МЕРААСАД аз ЯК колония

Ҳангоми гирифтани намунаҳо аз фарҳангҳои шўрбо, боварӣ ҳосил кунед Омехта таркиб барои таъмини тақсимоти яксонии микроорганизмҳо.

4. Бо истифода аз намунае, ки дар расми 1-5 нишон дода шудааст ва техникаи дар зер тавсифшуда сатҳи табақҳои агарро эм кунед.

а) бо ламс кардани ҳалқа ба сатҳи табақ дар наздикии ин дору пошед
канор, дар бахши болоии табақ. Доираро кашед сабук дар саросари
сатхи агар ба масофаи 2 см, аз канор ба марказ.

Коркарди табақро бо чанд роҳ анҷом додан мумкин аст, ки ҳамаи онҳо мекӯшанд олудашавии эҳтимолиро кам кунанд. Инструктори лабораторияи шумо як ё якчанд усулҳои имконпазирро нишон медиҳад. Барои ҳамаи инҳо, сатҳи агари табақро беасос нигоҳ надоред, танҳо дар ҷараёни рахҳо сатҳи онро фош кунед.

• Плита дар тарафи рост дар болои курсӣ боқӣ мемонад ва сарпӯш бардошта мешавад, аммо дар болои табақ нигоҳ дошта мешавад. Ба расми l-6a нигаред.

• Плита баръакс аст ва дар ҳоле ки сарпӯш дар курсӣ мемонад, поёни он бардошта мешавад ва сатҳи агар аз зери он парда мешавад. Ба расми l-6b нигаред.

Сипас ҳалқаро стерилизатсия кунед ва иҷозат диҳед, ки дар ҳаво чанд сония хунук шавад. Пеш аз идома додан, ҳалқаро ба канори истифоданашуда (минтақаи безарарии) сатҳи агар ламс кунед, то онро пурра хунук кунед.

б) Оғоз аз канори табақ дар наздикии пасандози аввалияи эмкунӣ, созед
якчанд (10-20) рахҳои параллелӣ, ки аз инокулуми аслӣ мегузаранд
амонат. Аз се як ҳиссаи табақро пӯшед, аз канор сар карда ҳаракат кунед
ба сӯи маркази лавҳа. Ин корро тавассути ба ақиб тоб додани дорандаи ҳалқа иҷро кунед
ва берун аз рӯи агар бо фишори хеле нарм ва ҳатто,
истифода бурдан танҳо як ҳаракати даст. Давра бояд қариб роҳи худро бо
ҳар як босуръат ҳангоми ҳаракат кардан аз сатҳи агар аз канор ба сӯи
маркази табақ. Кӯшиш кунед, ки ҳалқа, сим ва дорандаи ҳалқаро дар як ҳавопаймо нигоҳ доред
параллел ба сатҳи агар дар тамоми давра. Кӯшиш кунед, ки онро баланд накунед
ҳалқа аз агар. Кӯшиш кунед, ки ҳалқаро бо сатҳи тамос нигоҳ доред
оғози марҳила то ба охир. Доираро ба агар кобед
миёна,

* Доираро стерилизатсия кунед ва онро тавре ки дар боло тавсиф шудааст, хунук кунед.

в) лавҳаро 90 ° гардиш кунед.

Халқаро аз як канори рахҳои қаблӣ 2 ё 3 маротиба кашед, то ҳалқаро дубора эм кунед. Акнун сеяки дуюми табақро бо чанд (10-20) рахҳои параллелӣ боз аз канор сар карда, ба тарафи маркази табақ ҳаракат кунед. Пас аз дубора ворид кардани дубора, даст нарасондан ба сеяки аввали аллакай печидаи табақ.

* Халқаро стерилизатсия кунед ва онро тавре ки дар боло тавсиф шудааст, хунук кунед.

г) Табақро 90° гардонед.

Доираро аз як канори рахҳо дар сеяки дуюми табақ кашед, то дубора дубора эм кунед. Ҳоло сеяки охирини табақро тавре ки дар боло зикр шудааст, эҳтиёт кунед аз сеякҳои аввал ва дуюми табақаи аллакай ҷудошуда пешгирӣ кунед.

*Доираро пас аз пайдоиши охирин стерилизатсия кунед.

Д. Мавҷудияти микроорганизмҳо

Микроорганизмҳо дар ҳама ҷо мавҷуданд. Лаборатория дорои намудҳои гуногуни микробҳо, дар ҳаво, дар нишастҳо, дар фарш ва дар либос ва бадани шумо ҷойгир аст. Ин ҳама мавҷудияти микроорганизмҳо як сабаби он аст, ки шумо дар қисмҳои A, B ва C ин машқ усулҳои хуби асептикиро омӯхтед. Ин қисми машқ барои он тарҳрезӣ шудааст, ки ба шумо дар бораи намуд ва шумораи микробҳое, ки дар лаборатория мавҷуданд, тасаввурот диҳад. Инчунин озодие вуҷуд дорад, ки ба шумо имкон медиҳад, ки кунҷковии худро дар бораи микроорганизмҳои гирду атрофатон қонеъ кунед. Ниҳоят, аз шумо талаб карда мешавад, ки яке аз намудҳои бактерияҳоро, ки шумо аз ин машқ ба даст овардаед, барои истифода дар ду машқи навбатӣ ҷудо кунед.

1. Тафтиш кунед, ки агар дар зарринҳои шумо аз қисми А сахт шудааст, бодиққат ба хам кардани табақҳо ва ҷустуҷӯи ҳаракат. Агар агар агар сахт бошад, шумо метавонед бо заррин кор кунед. Як табақро дар поён ҳамчун "назорати стерилӣ" қайд кунед. Ҳеҷ гоҳ ин табақро накушоед. Ин барои санҷидани он, ки шумо ҳангоми рехтани табақҳои худ техникаи хуби асептикӣ доред, истифода мешавад.

2. Барои санҷидани олудагии табиии мақолаҳо дар муҳити шумо аз як табақ истифода баред. Инро "лавҳаи озмоишӣ" ва бо сарчашмаи "ангуштон, телефони мобилӣ ва ғайра" қайд кунед. Таҷрибаҳои пешниҳодшуда иборатанд аз: сабукфикрона ангуштони худро (бе дастпӯшак дар тан) ба сатҳи агари табақ молед, инро "таблиғи санҷишӣ, ангушт" меномед. ё табақчаро дар давоми 15-20 дақиқа ба ҳаво кушоед, ё сулфидан ба табақ, ё бо нармӣ сатҳи агарро бо ашёи киса ё ҷузвдони худ пок кунед. Инчунин намунае аз рӯи замин, ба монанди тахтаи боло, фарш, танӯр, либос ё пӯст имконпазир аст. Агар шумо ин корро кардан хоҳед, рӯи онро бо матои пахтаи хушкида хушконед ва сипас рӯи онро пошед пурра сатҳи агари табақ бо тампон. ламси сабукро истифода баред. Тампонҳо ба таври инфиродӣ бастабандӣ карда мешаванд ва то он даме, ки шумо онҳоро бо ягон чизи интихобкардаи худ олуда нашавед, безарар мебошанд. Боварӣ ҳосил кунед, ки нӯги пахтаи тампон ба чизи дигаре, ки аз рӯи он озмоиш карда истодаед, алоқа надорад. Барои ҷамъоварии намунаҳо аз сатҳи хушк тампончаи тареву беҳтар кор мекунад. Шумо метавонед як тампонро дар рӯи табақчаи ғизоии агар (дар як кунҷ) тар кунед, сипас майдони мавриди таваҷҷӯҳро интихоб кунед.

3. Ду табақи боқимондаро дар болои тахта нишони ва кушод нагузоред, ин лавҳаҳои иловагӣ барои ТА барои ҷамъоварӣ ва истифода барои синфи оянда мебошанд.

4. Фаромӯш накунед, ки поёни табақи намунавии худро қайд кунед. Ном ё насабҳои худ, фасли лабораторияи шумо, сана, намуди ВАО (NA барои агар маводи ғизоӣ) ва он чизе, ки намуна гирифта шудааст, дохил кунед (манбаъ).

Е. Инкубатсия

Барои афзоиши микроорганизмҳо ба онҳо муҳити мувофиқ лозим аст. Яке аз омилҳои муҳимтарини муҳити зист, ки ба афзоиши микроорганизмҳо таъсир мерасонад, ҳарорат аст. Ин дар лексия муҳокима карда мешавад ва як қисми машқҳои баъдӣ мебошад. Барои аксари организмҳои дар ин лаборатория истифодашаванда,

30 ° C ҳарорати қобили қабул барои афзоиш аст. Ҳарорати доимии афзоиш тавассути инкубатсияи фарҳангҳои микробҳо дар утоқҳои термостатикӣ назоратшаванда ё танӯрҳои хурде, ки инкубатор номида мешаванд, нигоҳ дошта мешавад.

1. Ҳама найчаҳоро аз қисми В дар инкубатори 30 ° C инкубатсия кунед. Боварӣ ҳосил кардан тамғагузории шумо қубурҳо равшан ва мукаммал мебошанд. Қубурҳоро дар рафҳо, ки инструктори шумо пешниҳод кардааст, ҷойгир кунед.

2. Ҳама плитаҳоро аз қисмҳои C ва D дар инкубатори 30°C инкубатор кунед. Боварӣ ҳосил кардан тамғагузорӣ лавҳаҳои шумо возеҳ ва мукаммал аст.

Азбаски консентратсияи баланди об дар муҳити агар, ҳангоми инкубатсия дар плитаҳои петри каме конденсатсияи об ба вуҷуд меояд. Агар плитаҳо дар тарафи рост ба боло инкубатсия мешуданд, эҳтимол намӣ аз сарпӯш то сатҳи агар мекашид ва паҳн мешуд. Ин ба ташаккули колонияҳои инфиродӣ халал мерасонад ва боиси афзоиши омезиши афзоиш мегардад. Барои роҳ надодан ба ин, плитаҳои петри ҳангоми инкубатсия ба таври мунтазам чаппа мешаванд (тарафи поён дар боло).

F. Мушоҳида

Мушоҳидаҳои муфассал калиди иҷро, фаҳмиш ва тарҳрезии таҷрибаҳои илмӣ мебошанд. Чашми амиқ ва таваҷҷӯҳ ба фарқиятҳои нозук ба шумо кӯмак мекунад, ки варақаҳои ҳисоботи лабораторияро бомуваффақият анҷом диҳед. Пас аз инкубатсия, плитаҳо ва қубурҳоро барои исботи афзоиши микробҳо мушоҳида кардан лозим аст. Мушоҳидаҳои худро дар варақаҳои ҳисоботи пешниҳодшуда сабт кунед. Инҳо танҳо роҳнамо мебошанд, озодона ба онҳо тағир диҳед ё илова кунед, агар шумо лозим донед. Дар хотир доред, ки ин варақаҳои ҳисобот дафтарчаи лаборатории шуморо ташкил медиҳанд ва барои баҳоҳо ва баҳодиҳии лаборатория асос мебошанд. Онҳо бояд ҳамеша навсозӣ карда шаванд ва ҳамеша ба лаборатория оварда шаванд.

НАМУНАҲОИ ХУДРО ТО БОВАРИ НАМОЕД НАТИҶАҲО ВА БЕШТАР НАМУНАҲО БАРОИ ОЯНДА ЛОЗИМ нестанд МАШК.

Видеои 1 -ро тамошо кунед: Усулҳои асептикӣ Шӯрбо, қубурҳо ва найҳои сӯзондан

Видеои 1-ро тамошо кунед: Усулҳои асептикӣ ocўрѓонтеппа шўрбо, нишеб ва корд. URL: https://youtu.be/nMoM8Ku5-8A

Видеои 2-ро тамошо кунед: Чӣ гуна бояд T-streak барои колонияҳои ҷудогона иҷро карда шавад.

Видеоро тамошо кунед 2: Барои колонияҳои ҷудогона T-streakро чӣ тавр бояд иҷро кард. Ин видео дар лабораторияҳои микробиологияи NC State сабт шудааст. URL: https://youtu.be/NsQv7QOmdXo


Стрейкинг (микробиология)

Дар микробиология, хат задан як усулест барои ҷудо кардани штамми холис аз як намуди микроорганизм, аксар вақт бактерияҳо. Пас аз он аз колонияҳои ҳосилшуда намуна гирифтан мумкин аст ва фарҳанги микробиологиро дар табақчаи нав парвариш кардан мумкин аст, то организмро муайян кардан, омӯхтан ё озмоиш кардан мумкин аст.

Усули муосири табақаи стрейк аз талошҳои Роберт Кох ва дигар микробиологҳо барои ба даст овардани фарҳангҳои микробиологии бактерияҳо бо мақсади омӯзиши онҳо пеш рафт. Аввалин бор обёрӣ ё ҷудокунӣ аз ҷониби Лоффлер ва Гаффки дар лабораторияи Кох таҳия карда шудааст, ки он обшавии бактерияҳоро тавассути пайваста пошидани онҳо дар берунаи агар дар табақи Петри барои ба даст овардани колонияҳои ҷудогона, ки баъдан ба миқдори ҳуҷайраҳо афзоиш меёбад, дар бар мегирад. , ё колонияҳои ҷудогона. Агар дар сатҳи агар микроорганизмҳо афзоиш ёбанд, ки ҳама аз ҷиҳати генетикӣ якхелаанд, пас фарҳанг фарҳанги микробиологӣ ҳисобида мешавад.